文章目录

摘要

Abstract

引言

第一部分 组蛋白H3K4me3 在中耳胆脂瘤中的表达

材料与方法

    1.研究对象

    2 主要仪器与设备

    3 主要试剂与耗材

    4 常用试剂的配制方法

    5 实验方法

    6 统计分析

结果

    1 Western blot结果

    2 免疫组织化学染色结果

讨论

结论

第二部分 组蛋白H3K4me3 甲基化酶及去甲基化酶在中耳胆脂瘤中的表达

材料与方法

    1.研究对象

    2 主要仪器与设备

    3 主要试剂及耗材

    4 实验方法

    5 统计分析

结果

讨论

结论

参考文献

综述

细胞增殖信号通路

    表皮生长因子受体/磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路

    丝裂原活化蛋白激酶信号通路

    IL-6/信号转导和转录激活因子3 信号通路

    DNA结合/分化-1/ NF-κB/ CyclinD1 信号通路的抑制剂

    MicroRNA介导的增殖信号通路

    角质形成细胞生长因子/KGF受体信号通路

    Rho/Rho激酶信号通路

医学治疗的发展

结论

参考文献

攻读学位期间研究成果

缩略词表(附录)

致谢

文章摘要:第一部分组蛋白H3K4me3在中耳胆脂瘤中的表达目的:量化组蛋白H3赖氨酸4的三甲基化（H3K4me3）在中耳胆脂瘤母组织及外耳道上皮组织中的表达,以研究其在中耳胆脂瘤发生、发展过程中的重要意义。方法:收集2017年9月到2018年6月我院耳鼻咽喉头颈外科收治的中耳胆脂瘤患者30例,以中耳胆脂瘤患者的胆脂瘤母组织为实验组,及同一患者的外耳道上皮组织为对照组,根据免疫印迹实验（Western blot）结果分析H3K4me3的表达水平;得到Western blot结果后,进行免疫组织化学染色实验验证Western blot实验结果,并定位H3K4me3在实验组和对照组中的表达。结果:1.免疫印迹实验结果显示组蛋白H3K4me3在胆脂瘤母组织中的表达水平的明显低于外耳道上皮组织,两者差异有统计学意义。2.免疫组织化学染色结果显示组蛋白H3K4me3在胆脂瘤上皮组织以及外耳道上皮组织中均有表达,定位于胆脂瘤上皮组织以及外耳道上皮组织细胞核中,表现为上皮组织细胞核中棕黄色或棕褐色颗粒;胆脂瘤母组织中组蛋白H3K4me3的表达量明显低于外耳道上皮组织,两者差异有统计学意义。结论:组蛋白H3K4me3在中耳胆脂瘤上皮组织中表达明显下调,可能参与了中耳胆脂瘤发生和发展过程,其有可能成为治疗中耳胆脂瘤的新靶点。第二部分组蛋白H3K4me3甲基化酶及去甲基化酶在中耳胆脂瘤中的表达目的:筛选影响中耳胆脂瘤上皮组织中组蛋白H3K4me3表达异常的主要因子。方法:收集2017年9月到2018年6月我院耳鼻咽喉头颈外科收治的中耳胆脂瘤患者13例,以中耳胆脂瘤患者的胆脂瘤母组织为实验组,及同一患者的外耳道上皮组织为对照组,通过RT-qPCR检测两组标本中JARID1家族（JARID1A,JARID1B,JARID1C,JARID1D）,MLL家族（MLL1,MLL2,MLL3,MLL4,SETD1A/B）,MLL5以及SET7/9各基因mRNA表达水平,进行相对定量分析,筛选出影响H3K4me3表达差异的可能因子。结果:荧光定量逆转录聚合链反应（RT-qPCR）结果显示组蛋白H3K4me3特异性甲基转移酶MLL家族多种基因在中耳胆脂瘤母组织中表达呈下降趋势,其中包括MLL1、MLL2、MLL5和SETD1A等;其特异性去甲基化酶在中耳胆脂瘤母组织中表达无明显差异。结论:组蛋白H3K4me3在中耳胆脂瘤组织中下调可能是MLL1、MLL2、MLL5和SETD1A等多种特异性甲基转移酶共同作用的结果。

文章关键词:

论文DOI:10.27262/d.cnki.gqdau.2019.001566

论文分类号:R764.21